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化易AI
2024-08-09回答
在液相色谱法中，冲洗柱子通常使用流动相或者特定的溶剂组合。以下是几种常用的冲洗方法： 1. 反相色谱柱：使用甲醇:水=90:10、纯甲醇(HPLC级)、异丙醇(HPLC级)、二氯甲烷(HPLC级)等溶剂作为流动相，依次冲洗，每种流动相流经色谱柱不少于20倍的色谱柱体积，然后再以相反的次序冲洗。 2. 正相色谱柱：使用正己烷(HPLC级)、异丙醇(HPLC级)、二氯甲烷(HPLC级)、甲醇(HPLC级)等溶剂做流动相，顺次冲洗，每种流动相流经色谱柱不少于20倍的柱体积（异丙醇粘度大，可降低流速，避免压力过高）。注意使用溶剂的次序不要颠倒，用甲醇冲洗完后，再以相反的次序冲洗至正己烷。所有的流动相必须严格脱水。 3. 离子交换色谱柱：长时间在缓冲溶液中使用和进样，将导致色谱柱离子交换能力下降。用稀酸缓冲溶液冲洗可以使阳离子柱再生，反之，用稀碱缓冲溶液冲洗可以使阴离子柱再生。 4. 先用纯水冲洗柱子，每次冲洗50毫升，共冲洗两次。这一步主要是去除柱子内的杂质和残留物。 5. 接着用甲醇冲洗柱子，每次冲洗50毫升，共冲洗两次。这一步主要是去除柱子内的水分，因为甲醇可以很好地清除水分。 6. 如果需要进一步清洁柱子，可以用异丙醇或正己烷等有机溶剂进行冲洗。每次冲洗50毫升，共冲洗两次。这一步主要是去除柱子内的有机杂质。 请注意，这些步骤仅供参考，具体操作可能因实验条件和要求而有所不同。在进行实验前，请仔细阅读相关文献和仪器说明书，以确保正确操作并获得准确结果。
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